抗體是免疫系統(tǒng)中一類重要的蛋白質(zhì),它們通過(guò)特異性方式來(lái)結(jié)合抗原。這一特性使之在診斷、治療、基礎(chǔ)研究等方面具有巨大的價(jià)值。抗體由四條多肽鏈構(gòu)成,兩條重鏈和兩條輕鏈,通過(guò)二硫鍵連接而成。它們通常被糖基化,其中羧基端區(qū)域高度保守,而氨基端區(qū)域在氨基酸序列上可變,從而產(chǎn)生抗體的特異性和多樣性。
在一系列的酶切和化學(xué)處理下,抗體分子被裂解為各種片段,通過(guò)HPLC分離,結(jié)合電泳和質(zhì)譜等手段,抗體的結(jié)構(gòu)可被了解和鑒定。近日,賽分科技的科學(xué)家通過(guò)體積排阻色譜、離子交換色譜和反相色譜等多種技術(shù)實(shí)現(xiàn)抗體異構(gòu)體、各種抗體碎片的高效分離,可對(duì)抗體結(jié)構(gòu)進(jìn)行可靠的鑒定和驗(yàn)證。此外,為抗體藥物的質(zhì)量控制也提供了有效的監(jiān)控手段。
一、結(jié)構(gòu)研究
體積排阻色譜法(Zenix™ SEC)
抗體片段重鏈和輕鏈的分離 | 抗體片段Fc和Fab的分離 |
離子交換色譜法(Antibodix™ WCX)
抗體片段Fc和Fab的離子交換色譜法分離
反相色譜法(Bio-C8)
Column: Bio-C8 4.6 x 100 (3 μm, 300 Å, 4.6 x 100 mm); Mobile Phase A: 0.11% TFA in water; Mobile Phase B: 0.09% TFA in ACN; Flow: 0.5 mL/min; Temperature: 75 oC; Detection: UV 280 nm | |
抗體片段重鏈和輕鏈的反相色譜法分離 |
二、抗體異構(gòu)體分析
Column: Antibodix™ WCX NP5 4.6 x 250 mm; Mobile phases: A: 20 mM sodium acetate, pH 5.15, B: A + 1 M LiCl; Flow rate: 0.8 mL/min; Detection: UV 280 nm. | |
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更多信息請(qǐng)參考:http://h4025.cn/training/Antibody Solution Kit.pdf